透射电镜制备注意事项(细胞)

1、细胞数量: > 1*10的6次方;

2、消化细胞时要注意不要过度，及时用含血清的培养液终止消化;

3、终止消化后，预冷的PBS (pH 7.4 )洗细胞1-2次离心(1500rpm, 5min)弃上清(细胞收集在1.5ml的EP管中) ;

4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制该溶液)，可用吸管轻轻吹散细胞，使细胞悬浮于固定液中;

5、4度固定过夜后寄出 (寄送时加冰袋，并用2.5%戊二醛溶液将EP管中剩余空间充满)。

肾脏组织样本制备步骤：

1、迅速取材；2、PBS漂洗2次，切成小块（米粒大小）；3、快速放入2.5%戊二醛固定液中，4度固定过夜；4、固定液将整个容器里面的空间都充满，封口膜封口；5、多加冰袋运输。