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Gibco胎牛血清的四个制备流程
发布时间:2021-04-07   点击次数:140次
  GIBCO胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中;因此,胎牛血清应用很广泛。比如,胎牛血清能够用在科研、工业生产、人兽疫苗生产的质量控制及生物技术药物的质量控制领域。其中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种,是细胞合成蛋白质的基本成分,其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成(称为必需氨基酸),必须由培养液提供。
  Gibco胎牛血清的四个制备流程:
  1、血清来源:可从世界各国收集胎牛血清,但是必须符合他的质量标准。地方当局还不清楚本地是否有牛海绵状病毒流行的血清不收集,有说明血清质量的证明资料:包括收集过程的全部资料、检验结果和交付情况。
  2、血清的收集:胎牛血清是心脏穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10个月内)血清静脉取血。血清采集条件必须符合工业生产的标准:低温下采集、一次分离、分离后立即混合冻存。符合要求的血清56℃水浴30分钟灭活。
  3、血清的制备:
  a. 超低IgG胎牛血清:通过亲和层析工艺去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBS γ球蛋白含量减到低,一般IgG≤5ug/ml,生物学活性不变。
  b. 血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/过氧化酶方法测定)。
  c. γ-射线照射:已经证明γ-射线照射可以有效灭活血清中可能污染的病毒、支原体。照射剂量为30~45KG。而且这个剂量的γ-射线照射不会改变血清的理化性质和对细胞培养的影响。
  4、除菌过滤:经过上述处理的粗制血清再经过一系列除菌滤膜过滤包括0.2微米(micron)和0.1微米滤膜。FBS要通过三层0.1微米滤膜,其他血清可通过0.2微米滤膜。
  GIBCO胎牛血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
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