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ZETA LIFE细胞增殖及毒性检测 CCK8试剂盒简介
发布时间:2021-11-24   点击次数:109次

ZETA LIFE细胞增殖及毒性检测-Cell Counting Kit(CCK试剂盒)

价格:¥615 - 2800

品牌:ZETA LIFE .

货号:K009

产地:USA

数量:1000

英文名:cck8

保质期:24 months

保存条件:4°C避光保存

规格:500T-3000T

 

CellCounting Kit简称CCK试剂盒,是一种基于WST (水溶性四唑盐,化学名: 2- (2-甲氧基-4-硝苯基) -3- (4-硝苯基) -5-(2,4-二磺基苯) -2H四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

                                             

 

CCKMTT的一种升级替代产品,和MTT或其他MTT类似产品如XTT. MTS等相比有明显的优点:

-CCK被线粒体内的脱氢酶还原成的formazan是水溶性,不需要有特定的溶解液来溶解,而WSTXTTMTS产生的formazan都不是水溶性的,因而可以省去后续溶解步骤。

-CCKXTTMTS更加稳定,使实验结果更加稳定。

-CCKMTTXTT等相比线性范围更宽,灵敏度更高。

 

 

操作说明:

一、制作标准曲线(测定细胞具体数 量时)

1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。

2、按比例(例如: 1/2比例)依次用培养基等比稀释成-一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度, 每组3-6个复孔。

3、接种后培养2- 4小时使细胞贴壁,然后加CCK试剂培养-定时间后测定OD值, 制作出一条以细胞数量为横坐标(X),

OD值为纵坐标(Y)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一

致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间)

二、 细胞活性检测

1、在96孔板中接种细胞悬液(100ul)。将培养板放在培养箱中预培养(379C, 5% CO2的条件下)

2、向每孔加入110ulCCK 溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)

3、将培养板在培养箱内孵育14小时。

4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

5、如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10ul 0. 1MHCL溶液或者1% wIv SDS溶液,并遮盖培养

板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

三、细胞增值~毒性检测

1、在96孔板中配置100u的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(379C5% CO2的条件下)

2、向培养板加入10ul不同浓度的待测物质。

3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如: 6 122448小时)

4、想每孔加入10ul CCK溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)

5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

7、如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10ul 0. 1MHCL溶液或者1% wIv SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

 

保存条件:

49C避光保存,有效期一年。

温聲提示:不可用于临床治疗。

 

 

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