Zeta Life Advanced 系列高效DNA RNA 转染试剂使用说明

品牌：Zeta Life

名称：Advanced 系列高效DNA RNA 转染试剂

㈠注意事项

1、质粒DNA 必须溶解于无菌双蒸水或超纯水，但不能溶解于Buffer。溶解于Buffer

的质粒转染效率会下降80%左右，甚至会转染失败。

2、质粒必须去除内毒素，内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性，会导致转染效率下降

70%-80%左右，甚至导致转染失败（推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega 去内毒素质粒提

取试剂盒）。

3、Zeta Life Advanced 系列高效DNA RNA 转染试剂在复合物的制备过程中是绝对不能

用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释，只需将核酸和转染试剂两者按1:1 比例直接混

合，如果进行了稀释会导致转染失败（80%的客户会按Lipo 的方法进行稀释）。

4、转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打10-15 次，室温孵育10-15 分钟后即可加入细

胞培养板。

5、转染24 小时后进行正常换液，不能像Lipo2000 一样转染4-6 小时后换液。

㈡简易操作说明

一、实验中核酸准备要求：

1、RNA 浓度20 uM /L。

2、质粒DNA 浓度200 ng-2 ug/u（l 注意：①溶解于无菌双蒸水或超纯水；②无内毒素）。

二、操作流程

1、先将细胞接种到细胞培养板，细胞汇合度在60-80%左右，再进行转染。

2、复合物制备：将核酸与转染试剂按照1:1 关系直接混合，用移液器吹吸10-15 次混

匀，室温静止10-15 分钟。

3、将复合物加入细胞培养板，并轻轻混匀，放入培养箱中继续培养。

4、转染24 小时后对细胞进行正常换液。

5、质粒DNA 转染48-72 小时后荧光检测转染效率，48-96 小时检测mRNA 或蛋白表

达。若进行稳定表达细胞株的筛选，则在转染后24-48 小时左右加入适量的药物进行筛选。

siRNA 转染后9 小时荧光检测转染效率，48-72 小时检测mRNA 或蛋白表达。

三、以细胞培养板、培养皿、培养瓶为例进行转染试剂、质粒DNA 及siRNA 的用量