技术文章您的位置:网站首页 >技术文章 > Zeta Life 高效DNA RNA 转染试剂-高效转染
Zeta Life 高效DNA RNA 转染试剂-高效转染
发布时间:2021-11-25   点击次数:117次

Zeta Life Advanced 系列高效DNA RNA 转染试剂使用说明

品牌:Zeta Life

名称:Advanced 系列高效DNA RNA 转染试剂


㈠注意事项

1、质粒DNA 必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于Buffer。溶解于Buffer

的质粒转染效率会下降80%左右,甚至会转染失败。

2、质粒必须去除内毒素,内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性,会导致转染效率下降

70%-80%左右,甚至导致转染失败(推荐使用QiagenTIANGENOmega 去内毒素质粒提

取试剂盒)。

3Zeta Life Advanced 系列高效DNA RNA 转染试剂在复合物的制备过程中是绝对不能

用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释,只需将核酸和转染试剂两者按1:1 比例直接混

合,如果进行了稀释会导致转染失败(80%的客户会按Lipo 的方法进行稀释)。

4、转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打10-15 次,室温孵育10-15 分钟后即可加入细

胞培养板。

5、转染24 小时后进行正常换液,不能像Lipo2000 一样转染4-6 小时后换液。

㈡简易操作说明

一、实验中核酸准备要求:

1RNA 浓度20 uM /L

2、质粒DNA 浓度200 ng-2 ug/ul 注意:溶解于无菌双蒸水或超纯水;无内毒素)。

二、操作流程

1、先将细胞接种到细胞培养板,细胞汇合度在60-80%左右,再进行转染。

2、复合物制备:将核酸与转染试剂按照1:1 关系直接混合,用移液器吹吸10-15 次混

匀,室温静止10-15 分钟。

3、将复合物加入细胞培养板,并轻轻混匀,放入培养箱中继续培养。

4、转染24 小时后对细胞进行正常换液。

5、质粒DNA 转染48-72 小时后荧光检测转染效率,48-96 小时检测mRNA 或蛋白表

达。若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48 小时左右加入适量的药物进行筛选。

siRNA 转染后9 小时荧光检测转染效率,48-72 小时检测mRNA 或蛋白表达。

三、以细胞培养板、培养皿、培养瓶为例进行转染试剂、质粒DNA siRNA 的用量

 


©2022  上海创凌生物科技有限公司 All Rights Reserved.  网站地图    管理登陆  技术支持:化工仪器网
在线客服 二维码

扫一扫,关注我们