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invigentech转染原代破骨细胞前体细胞的转染经验分享
发布时间:2021-11-29   点击次数:87次


西部战区总医院药学部,在2021年发表文章到Cell Communication and Signaling的学术期刊中科研者使用美国 Invigentech转染试剂,高效率转染原代破骨细胞前体细胞(Osteoclast precursor cells),具体转染原代破骨细胞前体细胞方法经验如下:(注意:本文转染实验中使用的细胞数量、试剂用量和操作方法不适用于传统lipo3000转染试剂或类似产品)。

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Cell culture

Sorted primary CD115(+) precursors were cultured in α-minimal essential medium (MEM) containing 10% FBS,1% penicillin-streptomycin solution and 50 ng ml 1 colony stimulating factor (M-CSF, Abcam). After 3 days,the medium was replaced with fresh medium. LA was added at a concentration of 100 μg/ml to stimulate the precursors. To inhibit the expression of Cadherin-11, the primary osteoclast precursors were transfected with Cadherin-11 siRNA using INVI DNA RNA Transfection reagent (Invigentech)for 24h. The sequence of Cadherin-11 siRNA was CCAATGGACCAAGATTTAT. In some experiments, primary cells were treated with BYL719 (2.5 μM), GSK690693 (25 nM), 666–15 (50 nM), rapamycin (20 μM), or AMG-487 (30 μM).

 

美国 Invigentech介绍
美国 Invigentech(英克)公司是开发用于细胞培养的胎牛血清、细胞活力检测、细胞筛选、细胞支原体清除、细胞转染和组织再生的新型血清替代品全球之一;提供inviCELL™Platelet lysate无动物血清产品用于支持广泛的细胞扩增和生产,包括培养间充质干细胞和多种免疫细胞系等,为制药公司或者生物技术公司提供无血清细胞培养规模生产服务;INVI DNA  RNA Transfection Reagent为原代细胞、悬浮细胞、小动物活体转染提供高品质转染试剂;此外我们引进的新设施可生产高纯度注射用水和生物处理解决方案,用于满足任何细胞、科研和企业客户需求,保证每个批次胎牛血清、细胞活力检测、细胞筛选、细胞转染等产品质量的稳定性,以加速安全有效的基于细胞和组织的治疗研究、开发和商业化。

 


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