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厌氧菌只能在没有游离氧存在时才能生长繁殖
发布时间:2021-12-27   点击次数:109次
  厌氧菌只能在没有游离存在时才能生长繁殖,在有氧的环境中不能生长甚至死亡,所以在研究分离及鉴定时,必须在低氧化还原电势的厌氧环境中进行。根据物理、化学或两者结合建立起来的厌氧菌的培养方法很多。操作简单、要求相对低的培养方法有厌氧袋、疱肉培养基法、碱性焦性没食子酸法等,对厌氧环境要求高、操作复杂的培养方法有厌氧手套箱和Hungate技术。厌氧菌的培养基可分为液体培养基和固体培养基。其中厌氧罐法有如下的原理:
  1.厌氧罐体的结构
  目前使用的厌氧罐的罐体采用透明聚碳酸酯硬质塑料或不锈钢制成。圆形罐盖的周边凹槽内嵌有橡皮圈,能使罐体和盖密封。罐体与罐盖之间有一个大的金属螺旋夹,可使罐体密闭。罐体内盖的正中下方,有个金属丝网盒或金属盘,用于放催化剂。
  2.厌氧罐的原理
  原理是用物理或化学的方法把密闭容器中的氧除去,制造一个无氧环境。常用的方法是油气换气法和气体发生袋法。
  抽气换气法:先把需厌氧培养的平板或液体瓶放入真空厌氧缸或厌氧罐中,再放入钯粒催化剂(可使罐中的氧与氢反应生成水,除去氧)和美蓝指示剂(缸中有氧时,指示剂为蓝色,缸中无氧时,指示剂变无色),然后利用真空泵对真空厌氧缸或厌氧罐抽真空,再反复充入无氧的氮气3次,最后充入80%的氮气、10%的氢气和10%二氧化碳的混合气体。钯粒能够促使混合气体中氧反应掉,美蓝指示剂显示无色,则厌氧环境形成。钯粒催化剂用过后,经干热2h后可重复使用。打开观察培养物后需重新抽气换气。
  该法的特点是只利用化学方法造成无氧环境,简便易行。该方法是在厌氧罐中放一个氢气、二氧化碳气体发生袋、催化剂、美蓝指示剂。在钯粒催化剂的作用下,罐中的氧气和氢气反应生成水,从而造成罐内的无氧环境。气体发生袋是由一丸硼氢化钠氯化钴合剂、一丸碳酸氢钠柠檬酸合剂及一片滤纸条组成。使用时剪去指定部分的一角,加入10 mL水,水沿滤纸渗到两个试剂丸上,发生反应,产生氢气和二氧化碳。
  使用时,加水后应立即放入罐中并密闭,即可厌氧培养。
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