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RAW264.7小鼠单核巨噬细胞转染试剂-AD600025试剂
发布时间:2022-01-20   点击次数:127次

简要描述:

RAW264.7小鼠单核巨噬细胞转染试剂用于哺乳动物细胞、活体动物转染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子转染试剂,此技术成为新的蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。

一、产品说明:

1、产品名称

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包装规格

货号:AD600025 、AD600050、AD600075、AD600150

规格:0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.5ml

3、储存条件

常温运输,4℃保存,可保存两年,拒绝反复冻融。

二、RAW264.7小鼠单核巨噬细胞转染试剂转染质粒8100bp效果图和转染条件

转染条件

质粒DNA大小:8100bp

培养板:6孔板

转染试剂用量:6ul

质粒DNA用量:电讯

转染试剂:Zeta Life Advanced DNA RNA转染试剂

转染时间:48小时

血清:Z7010FBS-500澳洲胎牛血清

细胞冻存:CE70100T无血清细胞冻存液

三、RAW264.7小鼠单核巨噬细胞转染试剂操作步骤:

材料准备

RNA 浓度 20 uM /L

质粒 DNA 浓度 300 ng-2 ug/ul(注意:①溶解于无菌双蒸水或超纯水;②无内毒素 )

提前 1 天接种细胞:细胞汇合度在 60-80%左右,再进行转染。

核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照 1:1 关系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混匀,室温静 止 10-15 分钟。

在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基 里面可以含有血清。

细胞换液:转染 24 小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液。

分析结果:质粒 DNA 转染 48-72 小时后荧光检测转染效率,48-96 小时检测 mRNA 或蛋白表达。若 进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后 24-48 小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA 转染后 9 小时荧光检测转染效率,48-72 小时检测 mRNA 或蛋白表达。

 

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