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3D类器官培养基质胶特点B-P-00003
发布时间:2022-02-08   点击次数:95次

Biozellen®基质胶 特点:

Biozellen®3D类器官培养基质胶套装

Biozellen®基质胶 特点:

1、100%植物源材料,无任何动物成分;

2、胺基酸序列100%人源化 ;

3、可调控基质胶硬度进行多种细胞培养;

4、3D细胞/类器官培养种类数量范围更广;

5、无人畜共通病原菌或毒素风险;

6、医疗级生物原料;

7、高活性、高纯度、可融化;

8、2年保存时间;

9、3D培养结束后基质胶可以温和融化,并保留3D细胞/类器官结构完整性;

Biozellen®3D类器官培养基质胶套装

Catalog No. B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10

Specification 2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit

Storage Store at-20℃. 1年保存.

一、产品描述

Biozellen®3D类器官培养基质胶套装包含整套基质胶、胶体固定液、胶体溶解液,可应用到3D细胞培养与微环境应用等;本试剂盒操作便利且可调控基质胶硬度进行多种细胞培养测试;植物胶体可快速形成水凝胶, 请操作前详细阅读此使用指南。

(Biozellen®3D类器官培养基质胶材料为植物来源,无动物成分)

二、应用

•3D类器官培养。

•3D细胞球体培养试验

•细胞侵袭

•细胞迁移

•小鼠皮下成瘤

•适合用于3D细胞药物筛检平台

•细胞生长和分化

•代谢/毒理学研究

•体外和体内血管生成分析

三、适用细胞种类

• 原代细胞 • 干细胞

四、试剂盒组分


五、使用步骤:

A、试剂制备

A基质胶:将A基质胶溶于37℃水浴槽回温10分钟, 确认完全融解.

C缓冲溶液(1X)制备:使用前将10X C缓冲溶液用冰的无细胞培养液(例如: 无血清DMEM、opt-MEM) 制备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) .

D 缓冲溶液(1X)制备: 使用前用冷的 1x PBS 稀释 10X D 缓冲溶液至 1X D 缓冲溶液.

B、Biozellen®3D类器官培养基质胶的制备

全部步骤需要在无菌环境内操作,操作步骤如下:

1. 将24孔培养板放置于冰箱或者冰上预冷。

2. 细胞计数后取 2×105~2×107 细胞与 0.5ml 37℃ 培养基均匀混合,并与0.5ml 37℃ A胶按照 1:1 等比例均匀混合,最终细胞密度1*105~1*107cells/mL。

:请选择适当的培养溶液与条件进行试验。

3.取 20-40 微升步骤 2 含细胞的混合 A 胶溶液滴于 步骤 1 预冷的培养板上,胶体将于 5 分钟内成胶。 注: 测试胶体是否成胶,可用微量吸管尖温和的触碰胶体表面进行确认。

4.待胶体成胶后,添加1毫升冰的1X C缓冲溶液,并盖过步骤3 的胶溶液,固定 15 分钟。

5.待15分钟固定后,小心的吸取 C 缓冲溶液并置换为适合此细胞生长之培养基溶液。

6将含有细胞的胶于37°C 二氧化碳培养箱内进行7~14天的培养,并观察细胞球体的形成,按正常培养基更换频率进行更换操作。

C、溶胶与收集细胞球体准备程序

小心的将培养基吸取移除,并用1X PBS进行清洗。

小心的将 1X PBS 吸取移除,并添加 1 毫升冰的D缓冲溶液,盖过胶滴于室温反应 5分钟。

温和的用1毫升移液管吸取,直到胶滴完全溶解。

将含有细胞球体的溶液吸入1.5 毫升离心管,用1000 rpm的转速离心10分钟,移除上清液体并收集细胞球体做分析。B-P-00003-2

D、收集单颗细胞准备程序

在分离单细胞前,先按上述溶胶与收集细胞球体准备程序进行操作

1. 添加trypsin-EDTA并与收集的细胞球体于37°C混合反应。

2. 用1毫升移液管混合,直到细胞体完全分解。

3. 待细胞球体完全分解,加入3倍体积的1X PBS,并用1000转的转速进行离心10分钟,并移除上清液体收集沉淀的单细胞做分析。


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