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ArcticZymes产品PCR去污染试剂盒80400-500
发布时间:2022-02-11   点击次数:91次
ArcticZymes Technologies成立于20世纪80年代后期,总部位于挪威。从海洋生物中识别新的冷适应酶,用于分子研究、体外诊断和治疗域。

订购信息


描述

在研究和诊断中,PCR是一种检测DNA是否存在的敏感方法。PCR中使用的聚合酶经常被E.coli DNA污染。当检测少量细菌DNA时,污染的DNA可能导致灵敏度降低和假阳性。其他污染源可能是dNTPs、缓冲体系、引物/探针,以及操作过程中引入的DNA污染。一般来说,对细菌的检测和分型采用16S或23S rDNA基因保守区段为靶点的广谱范围探针。该方法对细菌DNA污染非常敏感,而大多数Master mix和聚合酶中都发现细菌DNA的痕迹。当使用qPCR检测或定量少量的细菌DNA时,污染的E.coli DNA可能会导致假阳性结果。

为了解决这个问题,我们开发出PCR去污染试剂盒,既能去除Master mix中细菌DNA污染,又不影响PCR反应的灵敏度。此外,该试剂盒无RNase活性。

优势

1. 减少背景污染,提高目标基因检测下限;

2. 不影响PCR检测灵敏度;

3. 简单易用,操作方便。

应用 1. 去除PCR及RT-PCR的mastermix中E.coli内源DNA污染及其他DNA污染;

2. 用于终点PCR和探针依赖的qPCR;

3. 用于细菌检测及基因分型;

4. 用于古细菌DNA检测。

组分及特性

dsDNase:双链特异性DNA酶,去除Master mix、引物及探针等的污染DNA;

DTT:60℃条件下,能够不可逆灭活dsDNase,确保模板DNA不被清除。

不降低反应灵敏度 DNA污染是高灵敏度应用面对的主要问题。这些应用,以低丰度DNA为目标检测基因,易受到污染DNA的干扰。因此,任何影响PCR灵敏度的去除DNA污染的方法,都是不能使用的。

Figure 2. 用PCR去污染试剂盒处理/未处理的mastermix、5个10倍梯度稀释的gDNA和水(NTC)为模板进行qPCR检测。与NTC untreated组相比,NTC decontaminated组在45个cycle仍然没有信号,说明PCR去污染试剂盒能程度去除mastermix中的污染。PCR去污染试剂盒处理/后数据相比,Cq值并没有明显改变,说明基本不影响反应灵敏度。


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