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CELL-WISE 293培养基CW001产品特点和使用方法
发布时间:2022-05-10   点击次数:157次


CELL-WISE 293培养基品

货号:CW001

CELL-WISE 293培养基品牌产品特点:

瞬时转染用培养基,适用于HEK293细胞高密度悬浮培养

无蛋白、无动物源、化学成分限定

即用型完全培养基,无需添加额外成分

CELL-WISE的293培养基参数规格:

外观:

澄清透明红色液体

渗透压:

275±15 mOSM

pH:

6.9-7.4

无菌检测:

无菌

内毒素:

<5 EU/mL

储存条件

:2-8℃,避光

效期:

12个月

产品用途:

仅用于科学研究,不适用于人类或动物的诊断和治疗

CELL-WISE的293培养基使用方法:

细胞驯化

1)直接驯化

大部分情况下,培养于其他培养基中的细胞,可以直接适应Balance CD 293 medium,只要按照日常传代方式(稀释)更换培养基即可。

2)渐进式驯化

注意:选用低代次、处于对数生长期的细胞进行驯化

①在原培养基中复苏细胞并继续使用该培养基传代2到3次至细胞生长稳定,当细胞密度达到2x10 6 cells/ml后进行传代,传代细胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL,5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与Balance CD 293培养基的比例为75:25;

②将细胞置于37℃,5% CO2,转速为110-175 rpm的恒温摇床中进行培养;

③当细胞密度3-4天后达到3x10 6 cells/ml且细胞活率>90%,传代时5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与Balance CD 293培养基的比例为50:50,细胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如细胞生长慢,可离心上清,留20%条件培养基,加入80%的5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与Balance CD 293 培养基比例为75:25的混合培养基,继续培养;

④重复步骤③逐步增加Balance CD 293培养基所占的比例(5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与Balance CD 293 培养基的比例为25:75至10:90)直到100%的Balance CD 293培养基;

⑤经过在100%的 Balance CD 293 培养基中的几次传代培养,传代后3-4天细胞的密度可以达到2-3×10 6 cells/mL,细胞活率大于90%,这说明细胞已经完全适应了Balance CD 293 培养基。之后进行细胞的传代培养时,细胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL,般传代2-3次后再进行转染实验。

注意: 般细胞驯化过程中,三代细胞的状态可能不是很好,但般从第四代状态会有改善。


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