细胞和组织PCR 试剂盒Plus（免核酸提取）

货号：Nu-C01

试剂盒应用

本试剂盒可用于动物组织或细胞DNA 的克隆、重组细胞株鉴定、DNA 病毒鉴定、STR 鉴定等。TC-DNA-Lysis 采用配方，10 分钟内裂解各种细胞和组织。使用过程中无需大体积样本、无需反复离心，从而获得高质量的DNA 模板。经过验证，该试剂盒可以对单个细胞或10 个病毒粒子进行检测。

本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等域。

试剂盒组成

保存条件

-20ºC 保存。

使用将TC-DNA-Lysis 室温充分混匀，使用可4℃保存。

2×TaqMix(With Dye)溶解后需置于冰上，避免反复冻融。

需要准备

金属恒温浴、离心机、PCR 仪

使用方法

一、不同样品的处理方法

1. 组织液的处理

（1）组织液包括组织研磨液、细胞悬液等。取10 μL组织液置于离心管中。

（2）加入20 μLTC-DNA-Lysis。

（3）充分混匀。

（4）置于55℃作用5 分钟，然后95℃作用5min。溶液即为DNA 模板。

2. 组织块的处理

（1）用眼科剪剪取1-2mm 的组织块，并将组织块剪成肉泥状。

（2）加入20 μL TC-DNA-Lysis。

（3）充分混匀。

（4）置于55℃作用5 分钟，然后95℃作用5min。

（5）10,000 转离心60 取上清。上清即为DNA 模板。

3. 在DNase free 的离心管中配制PCR 反应体系

4. 按照以下方法设定PCR 反应

注意事项

一、试剂盒使用注意事项

（1）所有试剂应按照适合温度储存。请勿反复冻融。

（2）使用后均需要对操作区进行消毒，消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除剂等。耗材均需使用商品化的无酶耗材。

（3）TC-DNA-Lysis 采用配方，若出现肉眼可见小球状物质属于正常现象。

（4）TC-DNA-Lysis 频繁使用，可在4℃保存。不使用可放-20℃保存。

二、样本注意事项

（1）细胞在含/不含血清的环境中均可直接使用试剂盒。

（2）扩增2kb 以内片段，细胞样品浓度不超过1000 个细胞。如若扩增片段超过2kb，可适当提高细胞浓度。

（3）不同组织使用不同的眼科剪和眼科镊进行处理，防止交叉污染导致检测结果偏差。

三、试剂盒使用过程中注意事项

（1）PCR 过程中推荐使用阴性对照和阳性对照。

（2）整个过程中使用的吸头、离心管等耗材应丢弃在含有75%乙醇或核酸消除剂的容器中，防止形成环境污染。

（3）2×Master TaqMix(With Dye)已包含染料，可在反应结束后直接进行琼脂糖凝胶电泳。

（4）PCR 产物3’末端含有A，可直接进行TA 克隆。

四、试剂盒使用后注意事项

（1）TC-DNA-Lysis 处理后的DNA 模板可在-20℃保存至少1 个月。避免反复冻融，防止基因组断裂。

（2）PCR 反应完成后，严禁在实验区开盖。应在污染区进行琼脂糖凝胶电泳，防止气溶胶污染。

（3）为防止试剂盒污染，请勿将不同批号试剂盒混用。

检测实例

常见问题解析