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zeta转染试剂--人淋巴悬浮细胞转染试剂产品说明
发布时间:2022-06-08   点击次数:242次

 

 人淋巴悬浮细胞转染试剂(Zeta Life)适用贴壁细胞和悬浮细胞,细胞毒性低,转染率,适用细胞广。用于将 DNA 和 siRNA 转染到真核细胞系和各种原代细胞中。

一、人淋巴悬浮细胞转染试剂(Zeta Life)产品介绍

Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子转染试剂,此技术成为新的蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术。

二、产品应用

各种细胞类型中的转染效率。

可用于多种真核细胞系的DNA转染、siRNA转染和共转染;

可用于各种原代细胞的DNA转染、siRNA转染;

可转染度难转染的免疫细胞、悬浮细胞,如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;

可转染siRNA到任何哺乳动物细胞。

 

三、产品说明

1、产品名称

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2、包装规格

货号:AD600075

规格:0.75ml

3、储存条件

常温运输,4℃保存,可保存两年,拒绝反复冻融。

 

四、使用说明

1、材料准备

RNA 浓度 20 uM /L

质粒 DNA 浓度 300 ng-2 ug/ul(注意:①溶解于无菌双蒸水或超纯水;②无内毒素 )

2、操作步骤

提 1 天接种细胞:细胞汇合度在 60-80%左右,再进行转染。

核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照 1:1 关系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混匀,室温静 止 10-15 分钟。

在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基 里面可以含有血清。

细胞换液:转染 24 小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液。

分析结果:质粒 DNA 转染 48-72 小时后荧光检测转染效率,48-96 小时检测 mRNA 或蛋白表达。若 进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后 24-48 小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA 转染后 9 小时荧光检测转染效率,48-72 小时检测 mRNA 或蛋白表达。


 

五、表现

Zeta Life多肽小分子转染试剂的尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;

本转染试剂是通过细胞内㖔和细胞主动吸收进入细胞;

本转染试剂进入后对细胞膜无物理性损伤,不易出现细胞变形,保持高的细胞活力;

不激活细胞表面或细胞体内marker;

可反映真实的细胞通路蛋白原始数据;

可转染免疫细胞、悬浮细胞等。

 

 

六、注意事项

1、质粒 DNA 必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的 Buffer。溶解于 Buffer 的质粒转染效率会下降 80%左右,甚至会转染失败。

2、质粒必须去除内毒素,内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性,会导致转染效率下降 70%-80%左 右,甚至导致转染失败(推荐使用 Qiagen、TIANGEN、Omega 去内毒素质粒提取试剂盒)。

3、复合物的制备过程中是绝对不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释,只需将核酸和转染 试剂两者按 1:1 比例直接混合,如果进行了稀释会导致转染失。

4、转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打 10-15 次,室温孵育 10-15 分钟后即可加入细胞培养板。

5、转染 24 小时后进行正常换液,不能像 Lipo2000 一样转染 4-6 小时后换液。

6、原代细胞、免疫细胞转染时,细胞基础培养基里面不能含有双抗培养基。


 

Zeta Life Advanced DNA RNA转染试剂系列:

品牌:美国Zeta Life 货号:AD600025 (Zeta Life原代细胞转染试剂)0.25ml

品牌:美国Zeta Life 货号:AD600050 (Zeta Life真核细胞转染试剂)0.5ml

品牌:美国Zeta Life 货号:AD600075 (Zeta Life可代谢转染试剂)0.75ml

品牌:美国Zeta Life 货号:AD600150 (Zeta Life免疫细胞转染试剂)1.5ml

品牌:美国Zeta Life 货号:AD600500 (Zeta Life悬浮细胞转染试剂)5ml

品牌:美国Zeta Life 货号:AD601000 (Zeta LifeRAW264.7细胞转染试剂)10ml

 

人淋巴悬浮细胞转染试剂(Zeta Life)

Zeta Life介绍:

美国 Zeta Life 公司成立于 1989 年,是无血清细胞培养基 DMEM/F12 主要完成人,有三十多年的胎牛血清、无血清细胞培养基、以及干细胞、免疫细胞及肿瘤细胞等多种不同类型哺乳动物细胞的无血清培养液生产经验;也是目胎牛血清、无血清培养基的 OEM 供应商;每批血清均有完整的血源证明文件、兽医师检验证明及品质测试报告;ZETA LIFE 血清在 100 的无菌间采用全自动方式制造生产,具有良好的可再现性及可追溯性。 2018 年 Zeta Life 公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发用于哺乳动物细胞、活体动物转染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子转染试剂,此技术成为新的蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术。

 

原创作者:上海创凌生物科技有限公司

 

 

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