技术文章您的位置:网站首页 >技术文章 > 昆虫培养基CW003的产品介绍以及应用
昆虫培养基CW003的产品介绍以及应用
发布时间:2022-07-06   点击次数:106次



产品描述

CW003培养基适用于sf9、High Five等昆虫细胞悬浮培养和瞬时表达,含有细胞生长的全

部营养成分,无需添加物即可使用。

产品特点

 产品不含血清

 即用型*培养基,无需添加额外成分

 支持sf9、High Five等昆虫细胞的悬浮培养驯化与高密度培养

 支持杆状病毒载体表达系统生产重组基因蛋白

基础参数

产品使用方法

细胞驯化与传代

1) 培养条件

温度:27oC;推荐摇床转速:110-130 rpm;传代细胞密度控制在0.8-1.2×106 cells/mL。

2) 直接驯化

大部分情况下,培养于其他培养基中的sf9、High Five细胞,可以直接适应至CW003培养

基,只要按照日常传代方式(稀释)更换培养基即可。

3) 渐进式驯化

注意:选用低代次、处于对数生长期的细胞进行驯化。

①在原培养基中复苏细胞并继续使用该培养基传代2到3次至细胞生长稳定,使用原培养基

+CW003培养基(CW003比例从25%至90%)逐渐驯化,传代细胞密度控制在0.8-1.1×106

cells/mL,每48h进行传代。

②待细胞在含90%以上CW003培养基生长正常后,可尝试将细胞传代至100% CW003培养基

中,并连续传代3-4次,如细胞保持稳定生长,即已适应至CW003培养基。

细胞复苏

1) 迅速取出冻存的细胞,在37℃水浴条件下进行快速解冻(可以在水中轻轻晃动,时间控制

在120s以内),至冻存管内剩余小块冰晶。

2) 在生物安全柜中,将融化的细胞全部转移至无菌离心管中,加入10 mL预热至37℃的培养

基,离心换液(175 g,5 min)去除全部上清,加入20-30mL预热至37℃新鲜培养基重悬,后

转移至摇瓶培养。

细胞冻存

1) 冻存细胞时,要选择处于对数生长期、状态良好,活力≥98%的的细胞;

2) 事先计算好冻存的细胞管数和所用的培养基的体积,冻存密度为2.5-3.5×107 (通常冻存

浓度为1.0-2.0×107)cells/ml/支;

3) 细胞冻存液配制:

45%新鲜培养基+45%原培养基(上清)+10%DMSO,充分混匀,存放于4℃,一般为当

天用当天制备;

4) 以175 g,5 min的条件离心收集细胞,弃上清,用冻存培养基(

4℃ )重悬细胞;

5) 将重悬的细胞液迅速分装细胞到无菌的冻存管中,每支1ml,并贴好标签;

6) 将细胞冻存管放到程序降温冻存盒(注意填充异丙醇,4℃预冷)中,置于-80℃ 冰箱(每

分钟下降1℃),过夜存放后将细胞转入液氮罐中进行保存



©2022  上海创凌生物科技有限公司 All Rights Reserved.  网站地图    管理登陆  技术支持:化工仪器网
在线客服 二维码

扫一扫,关注我们