技术文章您的位置:网站首页 >技术文章 > IP-MS免疫沉淀串联质谱分析-蛋白质互作/后修饰原理介绍
IP-MS免疫沉淀串联质谱分析-蛋白质互作/后修饰原理介绍
发布时间:2022-07-12   点击次数:65次


免疫沉淀串联质谱分析(IP-MS)原理介绍:

蛋白质相互作用(Protein-Protein Interactions, PPIs)和翻译后修饰(Post-Translational Modifications, PTMs)的数据是能显著提高基础类研究文章档次的内容。筛选和发现目的蛋白(target)在细胞中新的互作蛋白或者新的后修饰,免疫沉淀(IP,Immunoprecipitation)结合LC-MS(液相色谱-质谱连用,蛋白质组学研究的核心工具)是目前的主流技术方案(IP-MS)。通过一次IP-MS实验,能高通量的鉴定和筛选到多个与要研究的目的蛋白(target)存在相互作用的蛋白质(蛋白质复合物组分),从而拥有属于自己的专属蛋白质相互作用数据库,通过深入的生物学功能与分子机制的分析,能发表多篇连续性的学术文章。

免疫沉淀串联质谱分析(IP-MS)应用领域:

免疫沉淀和质谱联用(IP-MS),可用来确认抗体与预期靶标的特异性相互作用。在现有的抗体验证方法中,这种方法的特别之处在于可以主动识别和定量纯化自样本的实际抗体靶标。与其他评估抗体特异性的技术(如,通过对基因敲除小鼠来源样本进行免疫印迹染色,确定某个消失的条带)不同,质谱法可以直接确定来源于样本蛋白的肽段序列。因此,IP-MS是确认抗体与预期靶标直接结合的方法。

免疫沉淀串联质谱分析(IP-MS)整体服务方案:

客户只需提供基因名称和细胞株即可,我方负责完成后续所有实验,包括:

基因克隆与慢病毒制备。

稳定细胞株构建与鉴定。

细胞扩增培养。

IP纯化蛋白质复合物并SDS-PAGE分离。

切割差异条带,LC-MS测试分析。

MS数据分析,挑选潜在的候选验证蛋白。

购买抗体,进行IP结合Western blot验证。


©2022  上海创凌生物科技有限公司 All Rights Reserved.  网站地图    管理登陆  技术支持:化工仪器网
在线客服 二维码

扫一扫,关注我们