1、血清的保存方法。
建议血清应保存在-5℃至-20℃。假如存放于4℃,请勿超过个月。若血清瓶次无法用完,建议无菌分装至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻,避免反复冻融。
2、在培养基中添加了血清和抗生素后,是否可以长期保存?
因为些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解,所以新鲜培养基中添加了血清和抗生素后,应该在两到三周内使用完毕。
3、如何解冻血清才不会使产品质量受损?
血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱融解,然后在室温下全融。解冻血清时,必须在融解过程中规则地摇晃均匀,使温度及成分均,减少沉淀的发生。
推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。因为长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。
请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
4、血清解冻后为何会有絮状沉淀物出现,该如何处理?
沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
血清中沉淀物的出现有许多种原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之。
去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g,1-2分钟稍微离心,上清液即可接着加入培养基内起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。
5、如何避免沉淀?
按如下操作可避免沉淀的产生:
1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均,减少沉淀的发生。
2) 血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均。
3) 勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
4) 勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
5) 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
6) 若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
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