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蛋白质印迹(WB)实验的意义和步骤介绍
发布时间:2022-08-08   点击次数:145次

免疫印迹(WB)

免疫印迹是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。结合化学发光检测,可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。

实验意义

WB用于鉴定能够被特异性抗体识别的大分子抗原(通常是蛋白质),并测定抗原的分子量。

实验步骤

1.蛋白样品制备

2.电泳分离

3.电转移

4.免疫印迹显色:ECL显色系统

结果展示

实验完成周期及交付标准

1. 实验周期:2-3周

2. 交付标准:黑白显色图、内参、灰度值分析、柱状图、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)

需确认的信息

1. 样本种属及类型,是组织还是细胞?

2. 需要检测目标蛋白。

3. 检测分样本数及分组,每张膜的上样顺序?

4. 是否购买一抗,本公司可代购。


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