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外泌体研究实验介绍
发布时间:2022-08-10   点击次数:52次



外泌体

外泌体是多泡体限制性膜与细胞质膜融合而释放的脂质双层膜囊泡,直径约30~200 nm,电子显微镜下呈双凹碟形或杯状,外泌体能够运载其内源性的蛋白质、脂质、核酸、miRNA等信息物质参与细胞间通讯和机体的生理代谢过程,被认为是细胞间通讯、疾病诊断和预后循环生物标志物的重要载体,在临床诊断和治疗方面展现出了具景的研究价值。外泌体通过其携带的蛋白质、核酸、脂类等来调节受体细胞的生物学活性,从而参与机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等生物学过程。

外泌体的负富集分离

外泌体在大小、来源和分子内容物方面均存在高度异质性,因此富集分离外泌体是开展其基础研究和临床转化应用的提。传统经典的富集分离外泌体的方法有:超速离心、密度梯度离心、试剂盒等技术手段。

外泌体鉴定

WB/ELISA检测膜蛋白:CD9、CD63、CD81,Alix, TSG101等。

透射电镜:形态学鉴定,双层囊膜结构是外泌体重要标志。

NTA纳米颗粒跟踪分析:外泌体特征粒径大多数处于100nm左右。

NTA、电镜和WB鉴定外泌体

需确认的信息

1. 样本类型及种属

2. 样本数量

3. 需鉴定方式(WB、电镜、NTA)



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