产品名称:广谱型DNA免核酸提取试剂
产品规格:1ml 50T
试剂盒应用
本试剂盒中配方,能够快速高效的裂解各种常见样本,无需反复离心,通过裂解方式获得高质量的DNA。该DNA无需进行纯化可以直接用于PCR、荧光定量PCR、Lamp等扩增。
DNA-Lysis可用于全血、血清、唾液、腹水、细胞、组织(例如淋巴结、脾脏、肾脏、扁桃体、肺、肌肉等)、拭子(例如血拭子、咽拭子)、鼠尾、病毒、革兰氏阳性菌、大肠杆菌、葡萄球菌以及环境样本(例如擦拭物、水样本、鞋底)等样品中基因组DNA的提取。
本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。
试剂盒组成
组分
M-DNA01
DNA-Lysis
1 mL
保存条件
4ºC保存。使用前将DNA-Lysis室温充分混匀(若出现肉眼可见小球状物质属正常现象)。
需要准备
金属恒温浴、离心机
使用方法
一、不同样品的处理方法
1. 组织液的处理
(1)组织液包括组织研磨液、传代细胞悬液、血清、唾液、尿液等。取20 μL组织液置于离心管中。
(2)取10 μL(1)中组织液,加入20 μL DNA-Lysis。
(3)混匀。
(4)置于55ºC加热5分钟。
(5)12000rpm离心2-3分钟,取上清。
注意:组织液为血液样品时,提取获得的DNA用于荧光定量PCR时,需要将提取物按照1:40稀释。例如5μL 提取物加入195μL中。
2. 组织块的处理
(1)取20 μL DNA-Lysis放置在离心管中。
(2)用眼科剪取半颗米粒大小的组织块(< 3 mm3),并将组织块剪成肉泥状,放在(1)中溶液中。
(3)混匀。
(4)置于55ºC加热5分钟。
(5)12000rpm离心2-3分钟,取上清。
3. 菌类的处理
(1)取20 μL DNA-Lysis放置在离心管中。
(2)用接种针/牙签挑取菌斑中一部分,放在(1)中溶液中。如果是培养液,取20μL放在(1)中溶液中。
(3)混匀。
(4)置于55ºC加热5分钟。
(5)12000rpm离心2-3分钟,取上清。
二、在DNase free 的离心管中配制PCR反应体系
注意事项
(1)在进行大量样品检测时,可将本试剂盒的试剂预分装到8联PCR管,用多通道移液器进行多样本的处理。
(2)取样的细胞量应当适中,浓度不宜过高或过低,处理后溶液应当以透明为宜。扩增细胞DNA时,取2000个细胞以内即可;扩增病毒基因时需要根据病毒的滴度决定取样的细胞数量。
(3)样品处理过程中应当防止交叉污染,推荐设置阴性样品参与处理过程,以检测环境的污染。
(4)PCR的退火温度可根据引物的预测Tm值减去5℃,或者通过梯度PCR摸索*佳退火温度。
(5)用本试剂盒处理的样品可于-20℃保存1个月。
(6)为防止试剂盒污染,请勿将不同批号试剂盒混用。