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NuSmart植物组织PCR试剂盒免核酸提取Nu-P01产品更新内容
更新时间:2023-02-22   点击次数:331次

试剂盒应用


本试剂盒适用于烟草、拟南芥、水稻、大豆、油菜、玉米、小麦等叶片和种子的PCR、荧光定量PCR检测。使用该试剂盒无需液氮研磨,无需使用有机试剂,无需重复离心便可获得用于PCR 反应的基因组模板。

依托Nu-Smart®平台PL-DNA Lysis 采用配方,5 分钟内获得花瓣、花蕊、种子、叶片、根、茎等样本的基因组DNA。叶片仅仅需取材1-4mm,取样量小,减少对样品的损耗。

预制的2× Plant SuperTaqMix 只需要加入引物和模板DNA 即可进行PCR 反应,减少移液次数,实现高通量扩增。该体系中添加有电泳缓冲液和染料,PCR 结束后直接进行琼脂糖凝胶电泳,使用方便快捷。

本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。

试剂盒组成

保存条件

-20ºC 保存。

PL-DNA Lysis 和2× Plant SuperTaqMix 经常使用可4℃保存,避免反复冻融。

需要准备

金属恒温浴、PCR 仪

使用方法

一、不同样品的处理方法

1. 叶片的处理

(1)用眼科剪或叶片取样器剪取1-4mm 的叶片。

(2)加入20 μL PL-DNA Lysis。

(3)充分混匀。

(4)置于55℃作用5 分钟。溶液即为DNA 模板。

2. 种子和果实的处理

(1)研磨后种子或1-2mm 果肉放入离心管中。

(2)加入20 μL PL-DNA Lysis。

(3)充分混匀。

(4)置于55℃作用5 分钟。

(5)10,000rpm 离心1 分钟,上清即为DNA 模板。

二、推荐PCR 反应体系

※:引物浓度可以在0.1-0.5 μM 范围内进行调节。

三、按照以下方法设定PCR 反应

注意事项

一、试剂盒使用前注意事项

(1)所有试剂应按照温度储存。请勿反复冻融。

(2)使用前后均需要对操作区进行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除剂等。耗材均

需使用商品化的无酶耗材。

(3)PL-DNA Lysis 频繁使用,可在4℃保存。长期不使用可放-20℃保存。

二、样本注意事项

(1)不同叶片使用不同的取样器进行处理,防止交叉污染导致检测结果偏差。

(2)叶片剪取不宜过大,以1-4mm 为宜。

(3)种子样本大小不一,建议研磨后使用。

三、试剂盒使用过程中注意事项

(1)PCR 过程中推荐使用阴性对照和阳性对照。

(2)整个过程中使用的吸头、离心管等耗材应丢弃在含有75%乙醇或核酸消除剂的容器中,减少环境污染。

(3)2× Plant SuperTaqMix 包含染料,可在反应结束后直接进行琼脂糖凝胶电泳。

四、试剂盒使用后注意事项

(1)PL-DNA Lysis 处理后的DNA 模板可在-20℃保存至少1 个月,如需长期保存,可离心后取上清置-80℃保存。避免反复冻融,防止基因组断裂。

(2)PCR 反应完成后,严禁在实验区开盖。应在污染区进行琼脂糖凝胶电泳,防止气溶胶污染。

(3)为防止试剂盒污染,请勿将不同批号试剂盒混用。

检测实例

常见问题解析



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