试剂盒应用
本试剂盒适用于小鼠基因克隆,转基因小鼠、基因敲除小鼠的快速PCR 鉴定。
结合Nu-Smart®平台升级Mu-DNA 配方,5 分钟内裂解鼠尾、耳朵、脚趾。使用过程中无需大体积样本、无需反复离心,从而获得高质量的DNA 模板。
试剂盒中2× EZ TaqMix(With Dye),包含有聚合酶、dNTPs 和优化的缓冲体系,PCR 过程中只需加入引物和模板DNA 进行扩增,减少开盖/移液等操作,减少交叉污染。该体系中添加有电泳缓冲液和染料,PCR 结束后直接进行琼脂糖凝胶电泳,使用方便快捷。
本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。
试剂盒组成
保存条件
-20ºC 保存。
Mu-DNA 和2×EZ TaqMix(With Dye),经常使用可4℃保存,避免反复冻融。
需要准备
金属恒温浴、离心机、PCR 仪
使用方法
1. 样品处理
(1)用眼科剪剪取1-2mm 的鼠尾、耳朵、脚趾。
(2)加入20 μL Mu-DNA。
(3)充分混匀。
(4)置于55℃作用5 分钟。
(5)10,000 转离心60 秒取上清。上清即为DNA 模板。
2. 推荐如下反应体系
3. 按照以下方法设定PCR 反应
注意事项
一、试剂盒使用前注意事项
(1)所有试剂应按照温度储存。请勿反复冻融。
(2)使用前后均需要对操作区进行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除剂等。耗材均需使用商品化的无酶耗材。
(3)Mu-DNA 频繁使用,可在4℃保存。长期不使用可放-20℃保存。
二、样本注意事项
(1)不同组织使用不同的眼科剪进行处理,防止交叉污染导致检测结果偏差。
(2)组织剪取量不宜过大,1-2mm 最佳。
三、试剂盒使用过程中注意事项
(1)PCR 过程中推荐使用阴性对照和阳性对照。
(2)整个过程中使用的吸头、离心管等耗材应丢弃在含有75%乙醇或核酸消除剂的容器中,减少环境污染。
(3)2×EZ TaqMix(With Dye)包含染料,可在PCR 反应结束后直接进行琼脂糖凝胶电泳。
四、试剂盒使用后注意事项
(1)Mu-DNA 处理后的DNA 模板可在-20℃保存至少1 个月。避免反复冻融,防止基因组断裂。
(2)PCR 反应完成后,严禁在实验区开盖。应在污染区进行琼脂糖凝胶电泳,防止气溶胶污染。
(3)为防止试剂盒污染,请勿将不同批号试剂盒混用。
常见问题解析
问题可能原因推荐解决方案