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NuSmart微生物PCR试剂盒Nu-Mi01产品应用及其介绍
更新时间:2023-03-22   点击次数:453次

试剂盒应用


本试剂盒适用于真菌(例如酵母、霉菌、担子菌)、细菌、病毒等微生物扩增。无需研磨,无需酶

类消化处理,无需经过硅胶膜或磁珠提取纯化,只需要将样本放入专用裂解液中,保证基因组完整

性。操作简,只需要10-15 分钟即可将裂解物产物作为扩增模板,加入到2× MIC Smart Mix 中。2× MIC

Smart Mix 包含修饰的DNA 聚合酶,相较于普通PCR,具有更高的保真度和更高的产量。PCR 产物

的3’含有A 末端,可直接克隆到T 载体。

本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。

试剂盒组成

保存条件

-20ºC 保存。

MIC Buffer 和2× MIC Smart Mix 长期使用可放在4℃,避免反复冻融。

需要准备

金属恒温浴、PCR 仪

使用方法

一、不同样品的处理方法

1. 酵母菌/细菌/病毒/霉菌等培养液

(1)取10μL 培养液和20μL MIC Buffer 充分混匀。

(2)置于55℃作用5 分钟,溶液即为DNA 模板。

2. 酵母菌/细菌/霉菌菌落

(1)挑取单菌落置于500μL 生理盐水中,涡旋混匀。

(2)加入20 μL MIC Buffer,充分混匀。

(3)置于55℃作用5 分钟,溶液即为DNA 模板。

3. 蘑菇类或者组织

(1)方法一:剪取1-4mm 菌盖或者组织,加入20μL MIC Buffer 充分混匀。

方法二:绿豆大小菌盖或者组织块放入组织匀浆器中研磨1-2 分钟。取10-20μL 与20μL MIC

Buffer 充分混匀。

(2)置于55℃作用5 分钟,溶液即为DNA 模板。

二、推荐PCR 反应体系

三、按照以下方法设定PCR 反应

注意事项

一、试剂盒使用前注意事项

(1)所有试剂应按照温度储存。请勿反复冻融。

(2)使用前后均需要对操作区进行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除剂等。耗材均

需使用商品化的无酶耗材。

(3)2× MIC Smart Mix 频繁使用,可在4℃保存。长期不使用可放-20℃保存。

二、试剂盒使用过程中注意事项

(1)PCR 过程中推荐使用阴性对照和阳性对照。

(2)整个过程中使用的吸头、离心管等耗材应丢弃在含有75%乙醇或核酸消除剂的容器中,减

少环境污染。

(3)2× MIC Smart Mix 包含染料,可在反应结束后直接进行琼脂糖凝胶电泳。

(4)为防止试剂盒污染,请勿将不同批号试剂盒混用。



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