本试剂盒适用于真菌(例如酵母、霉菌、担子菌)、细菌、病毒等微生物扩增。无需研磨,无需酶
类消化处理,无需经过硅胶膜或磁珠提取纯化,只需要将样本放入专用裂解液中,保证基因组完整
性。操作简,只需要10-15 分钟即可将裂解物产物作为扩增模板,加入到2× MIC Smart Mix 中。2× MIC
Smart Mix 包含修饰的DNA 聚合酶,相较于普通PCR,具有更高的保真度和更高的产量。PCR 产物
的3’含有A 末端,可直接克隆到T 载体。
本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。
试剂盒组成
保存条件
-20ºC 保存。
MIC Buffer 和2× MIC Smart Mix 长期使用可放在4℃,避免反复冻融。
需要准备
金属恒温浴、PCR 仪
使用方法
一、不同样品的处理方法
1. 酵母菌/细菌/病毒/霉菌等培养液
(1)取10μL 培养液和20μL MIC Buffer 充分混匀。
(2)置于55℃作用5 分钟,溶液即为DNA 模板。
2. 酵母菌/细菌/霉菌菌落
(1)挑取单菌落置于500μL 生理盐水中,涡旋混匀。
(2)加入20 μL MIC Buffer,充分混匀。
(3)置于55℃作用5 分钟,溶液即为DNA 模板。
3. 蘑菇类或者组织
(1)方法一:剪取1-4mm 菌盖或者组织,加入20μL MIC Buffer 充分混匀。
方法二:绿豆大小菌盖或者组织块放入组织匀浆器中研磨1-2 分钟。取10-20μL 与20μL MIC
Buffer 充分混匀。
(2)置于55℃作用5 分钟,溶液即为DNA 模板。
二、推荐PCR 反应体系
三、按照以下方法设定PCR 反应
注意事项
一、试剂盒使用前注意事项
(1)所有试剂应按照温度储存。请勿反复冻融。
(2)使用前后均需要对操作区进行消毒,消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除剂等。耗材均
需使用商品化的无酶耗材。
(3)2× MIC Smart Mix 频繁使用,可在4℃保存。长期不使用可放-20℃保存。
二、试剂盒使用过程中注意事项
(1)PCR 过程中推荐使用阴性对照和阳性对照。
(2)整个过程中使用的吸头、离心管等耗材应丢弃在含有75%乙醇或核酸消除剂的容器中,减
少环境污染。
(3)2× MIC Smart Mix 包含染料,可在反应结束后直接进行琼脂糖凝胶电泳。
(4)为防止试剂盒污染,请勿将不同批号试剂盒混用。