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创凌293细胞无血清培养基高产高效培养的优秀表现
更新时间:2023-03-29   点击次数:790次

CELL-WISE品牌的293细胞培养基是上海创凌生物科技有限公司独立自主开发的无血清培养基,是从实验室到大规模悬浮培养HEK293、293T、293等细胞的理想选择。可实现293细胞的快速生长,大程度上保障了生产工艺的安全性和可靠性。适用于病毒学研究、腺病毒载体疫苗等生物技术领域的大规模工业化生产。


CELL-WISE 293培养基品

货号:CW001

CELL-WISE 293培养基品牌产品特点:

瞬时转染用培养基,适用于HEK293细胞高密度悬浮培养

无蛋白、无动物源、化学成分限定

即用型培养基,无需添加额外成分

CELL-WISE的293培养基参数规格:

外观:

澄清透明红色液体

渗透压:

275±15 mOSM

pH:

6.9-7.4

无菌检测:

无菌

内毒素:

<5 EU/mL

储存条件

:2-8℃,避光

效期:

12个月

产品用途:

仅用于科学研究,不适用于人类或动物的诊断和治疗

CELL-WISE的293培养基使用方法:

细胞驯化

1)直接驯化

大部分情况下,培养于其他培养基中的细胞,可以直接适应Balance CD 293 medium,只要按照日常传代方式(稀释)更换培养基即可。

2)渐进式驯化

注意:选用低代次、处于对数生长期的细胞进行驯化

①在原培养基中复苏细胞并继续使用该培养基传代2到3次至细胞生长稳定,当细胞密度达到2x10 6 cells/ml后进行传代,传代细胞密度控制在0.5-0.6×10 6 cells/mL,5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与Balance CD 293培养基的比例为75:25;

②将细胞置于37℃,5% CO2,转速为110-175 rpm的恒温摇床中进行培养;

③当细胞密度3-4天后达到3x10 6 cells/ml且细胞活率>90%,传代时5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与Balance CD 293培养基的比例为50:50,细胞密度控制在0.5×10 6 cells/mL。如细胞生长慢,可离心上清,留20%条件培养基,加入80%的5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与Balance CD 293 培养基比例为75:25的混合培养基,继续培养;

④重复步骤③逐步增加Balance CD 293培养基所占的比例(5-10%血清的传统培养基或其他无血清培养基与Balance CD 293 培养基的比例为25:75至10:90)直到100%的Balance CD 293培养基;

⑤经过在100%的 Balance CD 293 培养基中的几次传代培养,传代后3-4天细胞的密度可以达到2-3×10 6 cells/mL,细胞活率大于90%,这说明细胞已经适应了Balance CD 293 培养基。之后进行细胞的传代培养时,细胞的起始密度可以降到0.3×10 6 cells/mL,般传代2-3次后再进行转染实验。

注意: 般细胞驯化过程中,三代细胞的状态可能不是很好,但般从第四代状态会有改善。



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