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ReadyAMP快速16S rDNA 细菌鉴定试剂盒介绍
更新时间:2023-11-13   点击次数:190次

试剂盒应用

本试剂盒主要用于细菌16S rDNA 的快速检测,无需经过繁琐的基因组DNA 提取纯化,取样后直接PCR 扩增即可获得16S rDNA 信息,通过比对16S 片段序列,终获得细菌种属信息。本试剂盒可以检测低至104 个/mL 个细菌,对难培养、珍贵样本、表型不能鉴定的未知细菌快速扩增尤为方便。使用本试剂盒无需提取纯化,可直接对菌斑、甘油菌或对数菌进行检测,从而
大大缩短了检测时间。试剂盒中提供的16S PCR Premix 已包含有染料,PCR 结束后直接进行琼脂糖凝胶电泳,PCR 产物可直接进行测序分析。本产品仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等域。


保存条件
-20ºC 保存。使用时请置于冰上。
使用方法
1、样本准备:
1)菌液:取对数菌液1-3 μL 加入PCR 反应体系中。
2)甘油菌:取1μL 菌液加入PCR 反应体系中。
3)单菌落:无菌吸头或者无菌牙签挑取单个菌落置于500 μL 无菌生理盐水中,涡旋混合均匀,取
1-3 μL 加入PCR 反应体系中。
2、推荐PCR 反应体系

4、琼脂糖凝胶电泳
使用1%琼脂糖凝胶进行电泳,不同菌株电泳片段稍微差别,一般为1.5kb 左右。
5、PCR 产物回收和测序
使用切胶回收试剂盒进行回收,并使用以下推荐引物进行测序。将DNA 测序结果与NCBI 数据
库进行比对,确定细菌种类。

注意事项
1、超净台中操作,应佩戴无菌手套,穿实验服,操作用75%乙醇对实验器具进行消毒。
2、使用无菌吸头和离心管,开盖务必轻柔,减少气溶胶污染。
3、尽可能使用2 次纯化细菌,以提高测序成功率。
4、尽可能使用对数的细菌。
5、为防止试剂盒污染,请勿将不同批号试剂盒混用。


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