试剂盒应用

本试剂盒中采用配方，能够快速的裂解各种常见样本，无需反复离心，通过裂解和吸附获得高质量的基因组DNA。该DNA 无需进行纯化可以直接用于PCR、荧光定量PCR、LAMP、STR等扩增。

NuSmart® DNA Lysis 可用于血样、唾液、腹水、细胞、组织、拭子、DNA 病毒、大肠杆菌、农杆菌、葡萄球菌、环境样本（例如擦拭物、水样本、鞋底）、支原体、衣原体以及植物等样品中基因组DNA的提取。

本试剂盒仅供研究使用，不可用于临床、食品、化妆品等域。

试剂盒组成

保存条件

4ºC 保存。使用将NuSmart® DNA Lysis 充分混匀。

需要准备

金属恒温浴、离心机

使用方法

一、不同样品的处理方法

1. 组织液的处理

（1）组织液包括组织研磨液、细胞悬液、血清、血液、唾液、尿液、精液、拭子处理液※等。取10 μL组织液置于离心管中。

※：棉签放入500μL生理盐水或无菌水中，浸泡5-10min，用力挤压后取10 μL置于离心管中。

（2）加入20 μL DNA Lysis。

（3）充分混匀。

（4）置于55ºC 加热5 分钟。溶液即为DNA 模板。

2. 组织块的处理

（1）用眼科剪剪取1-2mm 组织块，并将组织块剪成肉泥状。

（2）加入20 μL DNA Lysis。

（3）充分混匀。

（4）置于55ºC 加热5分钟。

（5）10,000rpm 离心2-3 分钟，取上清。上清即为DNA 模板。

3. 其他样本的处理

（1）菌类包括大肠杆菌、农杆菌、葡萄球菌等。取20 μL DNA Lysis 放置在离心管中。

（2）用接种针/无菌牙签挑取菌斑或10μL 培养溶液放入（1）中。

（3）充分混匀。

（4）置于55ºC 加热5 分钟。溶液即为DNA 模板。

4. DNA 病毒的处理

（1）细胞培养液参考“组织液的处理"。

（2）组织样本参考“组织块的处理"。

5. 植物样本的处理

（1）叶片参考“组织块的处理"。

（2）种子需磨碎后参考“组织块的处理"。

二、推荐PCR 反应体系

注意事项

一、试剂盒使用注意事项

（1）所有试剂按照温度储存。

（2）实验后务必对操作区进行消毒，消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除剂等。耗材需使用商品化的无酶耗材。

（3）DNA Lysis 采用利配方，若出现肉眼可见小球状物质属于正常现象。

二、试剂盒使用过程中注意事项

（1）PCR 过程中推荐使用阴性对照和阳性对照。

（2）整个过程中使用的吸头、离心管等耗材应丢弃在含有75%乙醇或核酸消除剂的容器中，减少环境污染。

三、试剂盒使用后注意事项

（1）DNA Lysis 处理后的DNA 模板可在-20℃保存至少1 个月。避免反复冻融，防止基因组断裂。

（2）PCR 反应完成后，严禁在实验区开盖。在污染区进行琼脂糖电泳，以防止气溶胶污染。

（3）为防止试剂盒污染，请勿将不同批号试剂盒混用。

检测实例

来源 范围

细胞 293T、A549、Vero、PK15、Sp2/0、HCT-116、Marc145、ST、siHa、MCF-7

人 头发、唾液、咽拭子、全血

小鼠 心、肝、脾、肺、肾、脑、脊柱、胃、大肠、小肠、胆囊、尾巴、脚趾、皮、耳朵、肌肉、EDAT 抗凝血、肝素钠抗凝血、枸橼酸钠抗凝血

猪 心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、精液、全血、血清

鸡 胃、肝、心、肺、脾

病毒 ASFV、PRV、PPV、PCV

细菌 金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、农杆菌、结核杆菌

真菌 酵母菌、白木耳、灵芝

植物 烟草、拟南芥、油菜、水稻、大豆、玉米、小麦、棉花、百脉根、西红柿、土豆、茄子、胡萝卜、龙眼、荔枝、苹果、香蕉、葡萄、铁皮石斛、丹参、益母草、红花、紫草、苦参、艾叶

亚洲 鲫鱼鱼鳍、鱼泡、鱼鳞、鱼籽

其他物种 支原体、衣原体