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透射电镜是种高分辨率、高放大倍数的显微镜,是材料科学研究的重要手段,能提供微细材料的组织结构、晶体结构和化学成分等方面的信息。透射电镜的分辨率为0.1~0.2nm,放大倍数为几万~几十万倍。
透射电镜简介:
透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,简称TEM),可以看到在光学显微镜下无法看清的小于0.2um的细微结构,这些结构称为亚显微结构或超微结构。要想看清这些结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨率。1932年Ruska发明了以电子束为光源的透射电子显微镜,电子束的波长要比可见光和紫外光短得多,并且电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比,也就是说电压越高波长越短。目TEM的分辨力可达0.2nm。
透射电镜制备注意事项(细胞):
1、细胞数量:> 1*10的6次方;。
2、消化细胞时要注意不要过度,及时用含血清的培养液终止消化;
3、终止消化后,预冷的PBS (pH7.4 )洗细胞1-2次,离心( 1500rpm, 5min) 弃上清(细胞好收集在1.5ml 的EP管中);
4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制该溶液),可用吸管轻轻吹散细胞,使细胞悬浮于固定液中;
5、4度固定过夜后寄出(寄送时加冰袋,并用2.5%戊二醛溶液将EP管中剩余空间充满)。
透射电镜实验流程:
1、取材
2、固定
3、脱水
4、包埋
5、固化
6、超薄切片机切片(50-60 nm)
7、3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色
8、透射电镜观察,拍片
15021202164
上海市杨浦区国康路100号2层
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