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NuSmart®核酸直接释放技术和标准核酸提取技术差别
更新时间:2024-03-15   点击次数:129次

NuSmart®核酸直接释放技术和标准核酸提取技术差别

基因组DNA提取作为分子生物学最常规技术之一是每个实验室研究人员最熟悉的技术。而想获得基因组DNA只需要将核酸外的结构破坏就能够将核酸释放出来。常见有以下几种方法,包括机械力裂解、酶裂解以及化学裂解。这几种方法的区别见下表:

方法

机械力裂解

酶裂解

化学裂解

原理

外力破坏细胞壁和/或细胞膜

消化蛋白质结构以及破坏组蛋白的缠绕

缓冲液体系中加入去垢剂破坏脂膜并释放内部成分

优势

操作简单、快速

无需机械力

操作简单

无需其他设备

劣势

多样本时比较耗时

处理过长中产热导致基因组降解

基因组容易断裂

需要研磨设备

价格昂贵

耗时

 

释放的抑制物对下游扩增有影响

不适合细胞器基因组的获得

 

落实在产品上,实验室标准核酸提取纯化包括有机提取、硅胶柱离心提取、磁珠吸附提取。这几种方法对比如下表:

方法

有机提取

硅胶柱提取

磁珠提取

原理

苯酚-氯仿抽提和离心进行分离和纯化

通过机械力和/或酶裂解释放核酸,硅胶柱与其形成静电吸附,通过离心和盐粒子洗涤进行分离纯化

通过机械力和/或酶裂解释放核酸,带电磁珠与其吸附,在磁场作用下进行分离纯化

样品

细胞、组织、植物等

所有样品类型

所有样品类型

纯度

通量

低通量

中通量

高通量

优势

充分裂解

价格便宜

特别适合难处理样本

操作方便

产量和纯度都高

可处理多种样本

产量高

不会堵塞

可设备自动化操作

劣势

使用有毒有害化学试剂

不易购买

容易堵塞

产量有上限

不利于微量样本操作

耗时

30-60分钟

30-60分钟

30分钟

通过对比发现以上方法操作复杂、费时费力且危险,为了解决这一问题,我们推荐NuSmart®核酸直接释放技术。该方法只需要5分钟,不同温度环境下,无需重复训练即可完成核酸直接释放。结合下游开发试剂盒,能够满足常规分子生物学实验室的需求。

方法

(NuSmart®核酸直接释放技术)

标准/传统核酸提取法

原理

通过试剂破坏细胞壁/膜和细胞核膜,释放基因组DNA。特殊纳米材料提高PCR灵敏度

通过机械力和/或酶裂解细胞释放核酸,硅胶柱等材料与其吸附,通过离心/磁场作用进行提取纯化

样品

任何样本类型

任何样本类型

样品量

细胞:1-103

组织:1-2mm

植物叶片:1-4mm

微生物培养液:10uL

细胞:>106

组织:>10mg

植物叶片:>100mg

微生物培养液:0.5-1mL

耗时

5分钟

30-60分钟

通量

高通量

硅胶柱法:中通量

磁珠法:高通量

优势

对于小量和微量样本十分友好

操作简单,无需训练

基因组完整性好

无酶、无有机试剂

无大型设备投入

 

操作方便

产量高

纯度高

劣势


基因组容易断裂

操作步骤多、费时

需要设备

 

 

 

 

 


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