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NuSmart®核酸直接释放技术在细菌鉴定中应用优势
更新时间:2024-06-24   点击次数:74次

NuSmart®核酸直接释放技术在细菌鉴定中应用优势

细菌属于原核生物的一种,虽然结构相对简单,但是在生物界属于数量最多的一类生物。细菌在生物界扮演着多重角色,既有乳品生产、抗生素生产、废水处理等积极的一面,也有作为病原菌感染人和牲畜从而导致疾病传播的危害一面。所以了解和控制细菌的特征和特性,对日常生产生活至关重要。

实验室条件下,细菌的鉴定主要有培养、生化鉴定、血清学鉴定等,但是这些方法均费时费力,尤其是细菌培养。而分子生物学方法是近年来更多被应用的方法,例如PCR技术。该技术对不易生长,培养条件复杂,未知细菌等表现良好。总结发现PCR在细菌中的应用包括以下方向:

1、基于16S rDNA基因的快速鉴定;

2、特异性基因的鉴定,例如毒力基因、耐药基因等;

3、食品微生物检测;

4、细菌数量动态检测;

5、常见呼吸道病原菌筛查;

6、细菌DNA图谱制作等。

对于实验室工作人员来说,细菌难培养,细菌增殖数量不够,环境中细菌复杂程度高等难点。而能够成功培养到目标细菌,且数量达标是PCR的关键前提。目前实验室工作人员常用细菌DNA柱式提取试剂盒进行基因组DNA的提取纯化。该方法作为经典方法长期被使用,但是整个操作过程需要40-90分钟不等,使用溶菌酶和蛋白酶K等生物活性酶类,多次反复离心,步骤繁多、使初学的操作者体验乐趣严重降低。我司开发的NuSmart®微生物 PCR 试剂盒che底解决以上痛点问题。优点如下:

—对样本量要求低(1-2uL菌液,1个菌斑)

—操作快速(5分钟释放基因组DNA)

—操作简单

—检出率达99.99%

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案例A 对数生长期细菌快速扩增16S rDNA

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革兰氏阴性菌:1 大肠杆菌 2 胞曼氏不动杆菌 3 肺炎克雷伯菌 4 奇异变形杆菌 5 铜绿假单胞菌

革兰氏阳性菌:6 蜡状芽孢杆菌 7 粪肠球菌 8 肺炎链球菌 9 金黄色葡萄球菌 10 假中间葡萄球菌

使用NuSmart®微生物 PCR 试剂盒(货号Nu-Mi01)处理对数生长期菌液,2× MIC Smart Mix扩增16S rDNA基因。

 

 

案例B 单菌落快速扩增16S rDNA

 

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革兰氏阴性菌:1 大肠杆菌 2 胞曼氏不动杆菌 3 肺炎克雷伯菌 4 奇异变形杆菌 5 铜绿假单胞菌

革兰氏阳性菌:6 蜡状芽孢杆菌 7 粪肠球菌 8 肺炎链球菌 9 金黄色葡萄球菌 10 假中间葡萄球菌

使用NuSmart®微生物 PCR 试剂盒(货号Nu-Mi01)处理菌斑(至于生理盐水中),2× MIC Smart Mix扩增16S rDNA基因。

 

 

案例C 甘油菌快速扩16S rDNA

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革兰氏阴性菌:1 大肠杆菌 2 胞曼氏不动杆菌 3 肺炎克雷伯菌 4 奇异变形杆菌 5 铜绿假单胞菌

革兰氏阳性菌:6 蜡状芽孢杆菌 7 粪肠球菌 8 肺炎链球菌 9 金黄色葡萄球菌 10 假中间葡萄球菌

使用NuSmart®微生物 PCR 试剂盒(货号Nu-Mi01)处理甘油菌,2× MIC Smart Mix扩增16S rDNA基因。

 


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