ReadyAMP®PCR直接扩增技术在油菜叶中应用及表现
基因工程油菜作为全球种植面积增长最快的作物广受科学家的关注。而油菜籽拥有丰富的油脂含量,使得油菜成为一种十分重要的油料作物。常见的转基因油菜方向包括品种改良、抗病、抗虫、抗除草剂等,想要获得一系列优良品种,则需要面对大量待筛选叶片。目前实验室提取基因组DNA的技术手段很多,例如CTAB法、离心柱提取法。但是以上方法操作步骤多、费时费力、效率极低,大大降低了实验室研究人员的积极性。一旦遇到田边采样,还面临着采样周期,快递回实验室检测等长周期检测过程,无法做到即采即做。
从经济角度考虑,目前应用于油菜叶片中提取基因组DNA的方法主要为CTAB法。该方法局限性很大,例如油菜叶取材量大、步骤多、离心步骤多、使用某些有毒有害试剂,且无法高通量操作。随着田边诊断的推进,加上逐年增加的油菜叶检测量,传统方法已经不能满足实验室需求,我司开发的ReadyAMP®油菜叶直接PCR扩增试剂盒能够快速、精准检测到目的基因。此方法优点如下:
—对样本量要求不高
—操作简单快速
—不用液氮研磨
—不用离心
—不使用蛋白酶和有毒有害有机试剂
案例A 油菜叶片扩增12对基因
RL:油菜叶片 +:植物基因组试剂盒提取基因组(20×) —:阴性对照
取油菜叶3mm,直接置于ReadyAMP®油菜叶片直接PCR扩增试剂盒(货号Nu-RAR01)中,扩增12个不同长度基因,用植物基因组提取试剂盒(货号Col-D04)提取基因组为对照(基因组20×稀释)。
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上海市杨浦区国康路100号2层
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