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浅谈内毒素对细胞培养的影响
更新时间:2024-08-06   点击次数:316次

浅谈内毒素对细胞培养的影响

 

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内毒素对细胞培养的影响

在细胞培养的精密世界中,一个微小的污染都可能dian覆整个实验的进程。今天,我们要聚焦的正是这个不容忽视的隐形威胁——内毒素。

BioProE是我公司自产的DPBS,低内毒素,对细胞的伤害降到zui低!

内毒素:细胞培养的“隐形刺客"

内毒素,这个听起来有些陌生的名词,实际上在细胞培养中扮演着不容忽视的角色。它是革兰氏阴性菌细胞壁的一种成分,当细菌死亡或细胞壁破裂后,内毒素就会被释放出来。这些微小的分子,虽然肉眼不可见,但却能对细胞产生巨大的影响。

在细胞培养过程中,内毒素的污染可能导致细胞生长缓慢、细胞毒性增加,甚至影响瞬时转染的效率。想象一下,您精心设计的实验,因为内毒素的污染而功亏一篑,是不是非常令人沮丧?对于追求精准与高效的现代生物研究而言,内毒素控制成为了不可回避的挑战。

 

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1 内毒素分子结构

 

内毒素对细胞培养的影响

1. 免疫和炎症反应: 内毒素可以激活细胞的免疫反应,导致炎症因子的释放,如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)等。这些炎症因子可以影响细胞的生理功能,导致细胞内信号通路的紊乱,甚至可能引发细胞凋亡。

2. 细胞生长和代谢的影响: 高水平的内毒素暴露可能影响细胞的生长和代谢。细胞在免疫激活状态下可能会减缓生长,因为它们需要将资源用于炎症反应。此外,内毒素可能干扰细胞的代谢途径,影响蛋白质合成、DNA合成等。

3. 实验结果的“ding时zhadan":内毒素的存在使实验结果变得不稳定,可靠性大打折扣。

4. 影响细胞因子和蛋白质的表达:内毒素的存在可能导致细胞产生炎症相关的细胞因子和蛋白质的表达增加。这可能对特定的研究课题产生影响,如细胞信号通路、蛋白质相互作用等的研究。

 

内毒素对瞬时转染的影响

内毒素的存在会极大程度地影响转染效率。由于内毒素的两亲性和负电荷性,性质类似于DNA,因此在质粒纯化中会伴随质粒一同被纯化出来。这些内毒素在转染过程中可能与转染试剂和质粒形成不稳定的复合物,从而降低质粒与细胞的结合效率和转染效率。

具体来说,高纯度的质粒、低类毒素细胞生长环境是获得高转染效率的必要条件,内毒素含量越低,转染效率也相应提高。特别是在使用阳离子聚合物转染试剂时,内毒素的影响更为显著,所以确保细胞培养液中低类毒素含量是非常重要的。

1. 转染效率降低:干扰转染复合物进入细胞或影响其在细胞内的作用,导致成功转染的细胞比例下降。

2. 基因表达异常:使转入基因的表达水平不稳定或降低,影响实验结果的准确性和可重复性。 
3. 细胞应激反应:引发细胞一系列应激相关的信号通路变化,进而间接影响转染过程和后续的基因表达。

 

如何降低细胞培养中的内毒素含量?

1.所有实验室器皿、培养基原料、以及适当的实验室技术的che底清洁,对于大幅降低细胞培养实验室中的内毒素水平至关重要。

2.使用来自可靠试剂供应商提供的经内毒素测试的试剂、补剂和培养基

总之,内毒素对细胞培养有负面影响,需要合理选择试剂,并严格控制培养条件,以降低内毒素对细胞的不良影响。选择合适的产品,可以让你的细胞培养实验更省心,尤其是难养的免疫细胞,干细胞等,更需要使用超低内毒素PBS、RPMI1640、DMEM、DMEM/F12等进行培养。

 

 

 

 


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