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NuSmart®核酸直接释放技术在EDTA抗凝血中应用2
更新时间:2024-08-14   点击次数:173次

NuSmart®核酸直接释放技术在EDTA抗凝血中应用2

血常规检测中最经常使用的就是EDTA抗凝血,它能够用于血细胞形态、生化检测、血型鉴定、标志物检测、基因筛查等。常见的基因筛查都涉及到核酸提取和扩增。检验科或者实验室最常使用的方法就是离心柱或者磁珠提取法进行DNA或者RNA提取。但是以上方法有以下盲点:

1、离心柱提取无法自动化,一次提取量受限于离心机规模,而且无法高通量操作;

2、磁珠提取法虽然能够高通量,但是设备昂贵;

3、离心柱或者磁珠提取血量一般不低于200-300µL;

4、离心柱提取的核酸含量比较高,而磁珠依据厂家不同得率不稳定;

5、前处理时间比较长;

6、离心柱的批间差异相对于磁珠更好控制;

综上所述,两种方法各有优缺点,在通量、效率、自动化上很难两全。鉴于此情况,我司开发的NuSmart®核酸直接释放技术和EDTA血检测相结合,仅需要10-20抗凝血,同时可以处理百份甚至千份血液。所含试剂中不包含有生物酶制剂,例如蛋白酶K,所以批间差异很小。总结如下:

— EDTA血量少

— 5分钟处理

— 高通量样本量

— 无脑操作

— 无需大型设备

 

操作流程

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案例A 不同体积人EDTA抗凝血处理后扩增4对引物

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1、0.1μL   2、1μL   3、10μL   4、20μL   5、50μL   6、100μL   7、200μL

使用NuSmart®血液 PCR 试剂盒Plus(货号Nu-B02)处理不同体积人EDTA抗凝血,使用2×Master TaqMix(With Dye)分别扩4对引物。

 

案例B 人EDTA抗凝血处理后在50μL体系下扩增

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1、1μL   2、2μL   3、5μL   4、10μL   5、15μL   6、20μL   7、23μL

使用NuSmart®血液 PCR 试剂盒Plus(货号Nu-B02)处理10μLEDTA抗凝血。在50μL扩增体系中,使用1μL到23μL模版体积扩增4对引物

 


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