细胞缺氧/复氧（Hypoxia/Reoxygenation, H/R）模型是研究心肌缺血再灌注损伤、脑卒中及肿瘤微环境的核心工具。然而，传统三气培养箱不仅购置成本高、气体消耗大，温度和氧浓度的细微波动还可能干扰细胞状态，影响实验可重复性。想要更经济、更便捷的缺氧方案？日本三菱瓦斯化学推出的D07细胞厌氧产气袋（二氧化碳5%），只需搭配密封培养罐，就能在普通培养箱中快速创造＜0.1% O₂ 的稳定缺氧环境，让您的缺氧再灌注实验化繁为简。作为三菱实验耗材中国区总代理，上海创凌生物为您详细拆解操作步骤。

三菱D07细胞厌氧产气袋（二氧化碳5%）核心原理

利用铁粉氧化反应吸收罐内氧气，同时释放约5% CO₂，无需加水、催化剂，不产热，对细胞零损伤。放入密封罐后约30分钟即可完成脱氧，配套的氧气指示剂慢慢从紫色变为粉色（指示剂变色时间较长，约6小时），厌氧状态一目了然。

细胞缺氧再灌注实验操作方法

1、细胞准备

将细胞接种于培养皿/板，正常培养至贴壁并达到所需密度。缺氧处理前吸弃原培养基，根据实验需求换成无糖DMEM、预先氮气平衡的缺氧培养基或其他低氧培养基。

2、装载密封罐

将细胞培养皿迅速移入密封培养罐（建议使用2.5 L规格），打开一包D07厌氧产气袋放入罐内（内含两种产气包，大的吸氧，小的吸二氧化碳，都放入密封培养罐，可放在培养皿上方或卡槽中），同时放入一片氧气指示剂。

3、密封与缺氧诱导

盖紧罐盖，确保密封圈完好。将密封罐放入37℃常规培养箱。罐内会迅速发热，有少量水汽，30分钟后罐内O₂浓度已＜0.1%，细胞进入缺氧状态。

4、缺氧培养

根据实验设计持续缺氧培养（如2h、4h、6h等，产气包设计气体稳定浓度最长可24小时）。期间指示剂保持粉色即说明厌氧条件稳定，可透过透明罐壁随时观察。

5、复氧/再灌注处理

缺氧时间结束后，打开密封罐，快速取出细胞，吸弃缺氧培养基，换上预热好的正常含氧含糖培养基，然后放回常规CO₂培养箱（5% CO₂，95%空气）继续培养。这一步骤即完成复氧，模拟体内再灌注过程。

实验优势一览

无需三气培养箱，大幅降低设备投入与气体成本；

操作简单，重复性好，同一批次可同时处理多个样本；

明确的气体环境（O₂＜0.1%，CO₂约5%），契合主流缺氧模型需求；

反应温和，不影响细胞活力。

认准总代理——上海创凌生物

上海创凌生物科技有限公司是日本三菱瓦斯化学授权的中国区总代理，长期现货供应D07缺氧产气袋、C-1厌氧产气袋、微需氧产气袋、密封培养罐及氧气指示剂等全系列原装产品。我们不仅提供正品保障与快速物流，更有专业技术团队为您优化缺氧实验方案，助您轻松获得稳定、高可重复性的细胞H/R模型。

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