氧糖剥夺(OGD)模型是体外研究脑缺血、心肌缺血等疾病的核心手段。然而,传统厌氧工作站价格昂贵、维护复杂,让不少实验室望而却步。日本三菱瓦斯化学推出的D07细胞厌氧产气包(二氧化碳浓度5%),仅需配合普通厌氧罐,即可在常规培养箱中秒变“微型厌氧工作站”,轻松构建稳定的OGD模型。作为日本三菱产气袋中国区总代理,上海创凌生物为您详解实验步骤。
实验准备
三菱D07细胞厌氧产气包(2.5L规格,配套2.5L厌氧罐)
三菱厌氧指示剂(可选,推荐C-22氧气指示剂)
无糖DMEM培养基、常规培养箱、三菱2.5L密封培养罐
操作步骤
细胞铺板:将待实验细胞接种于培养板中,正常条件培养至所需融合度。
换液诱导:吸弃原培养基,PBS轻柔洗涤后,迅速更换为预温的无糖DMEM培养基(D07已能保证物理缺氧)。
产气包激活:将D07内绿色小的产气包(吸收二氧化碳的)剪个小口放进密封培养罐中,撕开D07内大的产气包(吸氧的)外包装,内袋接触空气即自动产气,迅速放入厌氧罐内指定位置。同时放入打开的氧气指示片,观察其颜色变化。
密封培养:将换液后的细胞培养板快速移入厌氧罐,立即扣紧盖子,确认密封良好。将厌氧罐置于37℃常规培养箱。
缺氧时长:根据实验需求孵育1–6小时。D07产气后30分钟内罐内氧气浓度即可降至0.1%以下,二氧化碳浓度5%,厌氧指示片由紫变粉,直观确认厌氧状态。
复氧复糖:缺氧结束后,从罐中取出细胞,换回正常含糖培养基,置入CO₂培养箱进行再灌注。
为何选择三菱D07?
便捷:即开即用,无需催化剂、水或氢气,杜绝安全隐患。
快速稳定:产气快,维持厌氧环境长达48小时,批次间重现性优异。
灵活适配:可在同一培养箱内通过多个厌氧罐并行不同缺氧时程,互不干扰。
OGD造模不应被设备门槛束缚。上海创凌生物科技有限公司作为三菱厌氧产气包国内总代理,常年备货,正品保障,提供全程技术支持。需要大量建模的实验室,更可享受代理直供优惠。详询上海创凌生物,让您的缺氧实验从此省心省力。
上海市杨浦区国康路100号2层
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