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SILAC-exosome定量分析蛋白组学服务

SILAC-exosome定量分析蛋白组学服务

更新时间:2019-12-25

简要描述:

SILAC-exosome定量分析蛋白组学服务 在exosome的囊泡结构中含有细胞来源相关的蛋白质、核酸、脂质和小分子等物质,能作为信号分子传递给其他细胞以进行细胞间通讯。

简介:

Exosome(外泌体)是具有脂质双层膜结构、直径约为30-150nm、密度在1.13-1.21g/ml的膜性囊泡。在exosome的囊泡结构中含有细胞来源相关的蛋白质、核酸、脂质和小分子等物质,能作为信号分子传递给其他细胞以进行细胞间通讯。研究发现exosome在众多生理、病理过程中发挥着着重要作用。鉴于不同细胞分泌的exosome具有不用的组成成分和功能,故而exosome有望在多种疾病的早期诊断中发挥作用,此外,基于exosome的膜性结构,亦可作为靶向药物的载体进行疾病治疗。Exosome的这些特性使其成为当前的热门研究对象。

Exosome在细胞中的蛋白质含量极低,分离并获取足量的exosome蛋白是进行LC-MS分析的前提条件。SILAC结合LC-MS就能很好的进行exosome蛋白的定量比较分析,体现在:(1)SILAC是体内标记,自然在exosome中的蛋白质也是SILAC标记的;(2)所需的蛋白量少,SILAC标记的和未标记的exosome蛋白各15-20μg足够进行MS鉴定与定量;(3)蛋白质提取和后续操作步骤极为简单方便,只需提取exosome蛋白、定量、1:1混合即可。(3)蛋白质定量和分析软件成熟(Maxquant和Perseus),结果分析方便直观。

二、SILAC-exosome定量分析蛋白组学服务方案:

(一)整体服务:

只需客户提供细胞即可,我方负责完成:

SILAC培养基制备。

细胞SILAC标记及标记效率MS检测;

SILAC标记细胞与非标记细胞扩增、exosome分离及exosome蛋白质提取;

提取蛋白质定量、1:1混合、SDS-PAGE分离及染色;

切割条带,分别进行LC-MS测试;

MS数据分析,完成蛋白质的鉴定及定量分析,筛选差异表达蛋白;

差异表达蛋白常规生物信息学分析;

(二)合作共赢方案:

原则是通过协商签订合同,双方各完成一部分实验内容。

客户方需从我方购买相应的SILAC培养基及耗材。我方提供细胞SILAC标记的实验方案,协助客户完成细胞的SILAC标记过程。

标记完成后,需用LC-MS鉴定细胞标记效率。该步骤需交由我方完成鉴定。

最终正式实验的蛋白质样品,需交由我方完成MS鉴定和定量分析。

三、其他特色:

SILAC培养基。我方能生产多种类型的SILAC培养基(K6R6、K4R6、K6R8、K8R10等),7-10个工作日发货,免去客户从国外进口SILAC培养基及其标记氨基酸的漫长货期。

SILAC培养基,500ml起订。

我方同时销售SILAC相关的试剂/耗材(dialyzed FBS,filter等),欢迎咨询。SILAC-exosome定量分析蛋白组学服务


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