技术文章您的位置:网站首页 >技术文章 > EPC细胞免疫荧光实验报告
EPC细胞免疫荧光实验报告
发布时间:2019-12-11   点击次数:282次

一、 实验仪器与试剂

表格一:实验仪器

仪器

厂家

型号

细胞培养箱

Thermo Scientific

HERA cell CO2

 激光共聚焦显微镜

Leica

TCS SP5

表格二:试剂

试剂

厂家

细胞培养基

Gibco

PBS (0.1 M, pH 7.4)

自配

4 %多聚甲醛溶液

索来宝

BSA

Sigma

Triton-x-100

生工生物

FITC 标记羊抗兔荧光二抗

Santa Cruz

DAPI

碧云天

二、 实验步骤

制作细胞爬片,根据实验方案进行加样操作;

反应 24h 后,弃原有培养液, PBS 洗 1 次;

4%的多聚甲醛 4 度固定 15 分钟,PBS 洗 2 次,5 分钟/次;

4. 加入 0.1%的 Triton-x-100,室温孵育 15 分钟;

5. PBS 洗 3 次,5 分钟/次;

6. 10%BSA 封闭 30 分钟;

加入一抗 50μL(稀释度为 1:100),4℃过夜孵育;

第二天复温 30min,PBS 洗 3 次,5 分钟/次;

每组分别加入 FITC 标记羊抗兔荧光二抗 50μL(稀释度为 1:500),37℃培养 30 分钟;

PBS 洗 3 次,每次 5 分钟;

11. DAPI 染色 5 分钟;

PBS 洗 3 次,每次 5 分钟;

在激光共聚焦显微镜上观察(使用 405nm 和 488nm 的激发光源进行荧光检测)。  

三、 实验结果

©2020  上海创凌生物科技有限公司 All Rights Reserved.  网站地图    管理登陆  技术支持:化工仪器网
在线客服 二维码

扫一扫,关注我们