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流式细胞增殖-实验原理介绍
发布时间:2022-08-17   点击次数:70次


技术原理

EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine),中文名为5-乙炔基-2' -脱氧尿苷,是一种新型胸苷(胸腺嘧啶脱氧核苷,thymidine)类似物,EdU可以在DNA合成过程中替代胸苷掺入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能与荧光标记的小分子叠氮化物探针(如Azide Alexa Fluor 488、Azide Alexa Fluor 555、Azide Alexa Fluor 594、Azide Alexa Fluor 647等)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Click reaction),通过点击反应,新合成的DNA会被相应的荧光探针所标记,从而可以使用适当的荧光检测设备检测到增殖的细胞。

实验方法

Step1:细胞培养

Step2:转染或药物处理

Step3:加EDU试剂

Step4:细胞收集

Step5:上机检测

案例展示


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