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ColProof植物DNA快速提取试剂盒Col-D02产品应用介绍
更新时间:2023-03-22   点击次数:335次

试剂盒应用

本试剂盒采用裂解液配方在10 分钟内完成植物叶片、种子等的裂解、提取和纯化。提取对象包

括水稻、玉米、小麦等作物,也包括多糖多酚类植物(例如棉花、马铃薯、铁皮石斛等)。整个提

取过无需使用蛋白酶K 等酶类制剂。提取DNA 可用于PCR、qPCR、Sorthern Blot、分子克隆、文

库构建等。

本试剂盒仅供研究使用,不可用于临床、食品、化妆品等领域。

试剂盒组成

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保存条件

室温保存一年。

自备材料

无水乙醇、无DNase 和无RNase 离心管、β-巯基乙醇(选用)、RNaseA(10mg/mL,或货号QR0101)

使用方法

1. 液氮研磨新鲜植物样本(如叶片、种子、花蕊约20-100mg),加入700μL 裂解液DP,充分混匀,

室温静置1 分钟。

备注:多糖多酚类样本,每700μL 裂解液DP 中加入14μLβ-巯基乙醇,从而提高RNA 得率。

2. (选做)加入5μL RNase A(10mg/mL),室温静置5-10 分钟。

3. 加入0.5 倍体积无水乙醇,上下颠倒混匀,12,000rpm 离心1 分钟。

4. 取700μL 上清加入DNA 吸附柱中,12,000rpm 离心30 秒,倒掉收集管中废液。

5. 向DNA 吸附柱中加入500μL 洗涤液DWA,12,000rpm 离心1 分钟,倒掉收集管中废液。

6. 向DNA 吸附柱中加入500μL 洗涤液DWB,12,000rpm 离心30 秒,倒掉收集管中废液。

7. 重复步骤6 一次。

8. 12,000rpm 离心2 分钟,倒掉收集管中废液。

9 将DNA 吸附柱放入新无DNase 和无RNase 离心管中,加入30-50μL 洗脱液P,室温放置1 分钟。

10. 12,000rpm 离心2 分钟,得到DNA 溶液,-80℃保存。

注意事项

1. 经常更换手套,防止DNA 污染。

2. 使用无DNase 无RNase 的吸头和离心管,防止DNA 降解。

3. 常更换吸头,防止交叉污染。

4. 动作轻柔,防止基因组DNA 断裂。

5. 为了提高洗脱效率,可提前将洗脱液P 置于65℃水浴后再使用。


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