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NuSmart®核酸直接释放试剂盒为植物样本加持 ——买液氮成为过去式2024
更新时间:2024-05-23   点击次数:102次

NuSmart®核酸直接释放试剂盒为植物样本加持

——买液氮成为过去式

植物样本的传统提取DNA或RNA之前都需要对样本进行液氮研磨破坏细胞壁,这样做的好处有以下几点:

1、植物细胞具有坚固的细胞壁,特别是纤维素和木质素等成分,使用液氮研磨可以有效地破坏这些细胞结构,使得细胞内DNA/RNA更容易释放;

2、低温环境有助于减少核酸酶的活性,提高核酸的提取质量和产量;

3、使样本均匀破碎,增加提取试剂与核酸的接触面积,提高核酸提取的效率;

4、对于长片段研究时,更能保持完整性;

看来液氮研磨是不可少的步骤,但是一旦样本量成百上千,液氮研磨就成为繁琐的限速步骤,而且液氮的温度低至-196℃,使用过程中极易误伤,对实验室人员安全意识要求很高。总结发现使用液氮有以下几个缺点:

1、温度极低,使用过程中需要佩戴手套和护目镜;

2、起始样本量大一些,避免研磨过程中损失;

3、无法高通量操作;

4、无法自动化操作;

5、操作需谨慎,导致提取DNA时间延长数倍;

那怎么办呢?NuSmart®核酸直接释放试剂盒来助力,试剂盒中PL-DNA Lysis和叶片混合后,55℃反应5分钟,DNA模板就制备好了,操作流程见下图。整个操作流程非常简单,不用担心液氮使用问题,也不用担心一天的效率太低,提高整个工作效率。

图片1.png



NuSmart®核酸直接释放技术的优势是什么?划重点来了——

√对于小量和微量样本十分友好

√操作简单,无需训练

√基因组完整性好

√无酶、无有机试剂

√无大型设备投入

总结来说,NuSmart®核酸直接释放试剂盒中不含有任何有毒、易燃、易爆成分,甚至无需佩戴手套即可取用。

 

样本量低对于分子生物实验室科研人员来说一直都是一个痛点,例如法医鉴定的拭子含量都是微量

待分类细菌没有合适的培养基培养,产量很低

流式分选后细胞很少很少

之所以是痛点,主要是因为按照实验室常用核酸提取方法只有离心柱提取法或者磁珠提取法,这些方法都需要大量样本支持。例如30mg组织、106个细胞、100mg水稻叶片、1mL血液等等。这些条件成为下游实验的限速因素。库思择开发的NuSmart®核酸直接释放试剂盒对微量样本非常友好,甚至一个细胞不在话下。参考下图,使用NuSmart®细胞和组织PCR试剂盒Plus对一个细胞进行处理后,可以有效扩增长达4kb的基因。

图片2.png

      

使用NuSmart®细胞和组织PCR试剂盒Plus(货号Nu-C01)处理1个Sp2/0细胞,使用2×Master TaqMix(With Dye)扩增不同长度基因(分别0.5kb、1kb、2kb、3kb、4kb)

 

 

总结来说无论样本多少,只要有完整结构、有核酸NuSmart®试剂盒都能够解决

目前可以使用的样本参考如下:

来源

范围

细胞

293T、A549、Vero、PK15、Sp2/0、HCT-116、Marc145、ST、siHa、MCF-7

 

头发、唾液、咽拭子、全血、精液、肿瘤切片

小鼠

心、肝、脾、肺、肾、脑、脊柱、胃、大肠、小肠、胆囊、尾巴、脚趾、皮、耳朵、肌肉、EDAT 抗凝血、肝素钠抗凝血、枸橼酸钠抗凝血

/鸡/羊

心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、精液、全血、血清

亚洲鲫鱼

鱼鳍、鱼泡、鱼鳞、鱼籽

病毒

ASFV、PRV、PPV、PCV

细菌

金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、农杆菌、结核杆菌、粪肠球菌、链球菌

真菌  

酵母菌、曲霉菌、犬小孢子菌、口蘑、平菇、白木耳

植物

 

烟草、拟南芥、油菜、水稻、大豆、玉米、小麦、棉花、百脉根、西红柿、土豆、茄子、胡萝卜、龙眼、荔枝、苹果、香蕉、葡萄

中草药

铁皮石斛、丹参、益母草、红花、紫草、苦参、艾叶、灵芝、麦冬、金银花、淫羊藿、茯苓、苍术、白术、百合、半夏

其他微生物

支原体、衣原体、螨虫、跳虫

 

 

 


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